Lingkup penerapan sistem pelapisan kromatografi cair tekanan rendah: penelitian ilmiah dan persiapan dalam industri biokimia, kimia sintetis, produk alami, pengembangan obat, kimia makanan, kimia pertanian, kosmetik, polimer dan petrokimia. Dapat melakukan lapisan pertukaran ion, lapisan afinitas, lapisan penyaringan gel, lapisan hidrofobi, dan metode lain, untuk analisis pemisahan, pengujian aliran protein, enzim, asam nukleotida, nukleotida, polipeptida, (termasuk / tanpa asam amino aromatik) dan sampel biologis / non-biologis yang diserap UV lainnya, adalah pilihan yang ideal untuk pemurnian molekul biologis, memiliki banyak fungsi, penggunaan yang mudah, ekonomi dan karakteristik lainnya. Desain kompak yang memaksimalkan penghematan ruang di gudang dingin dan laboratorium.

Catatan

Berbagai indikator teknis yang diperlukan untuk detektor UV sinar ganda berkinerja tinggi dalam konfigurasi sistem digunakan untuk pengujian kuantitatif pabrik obat di pabrik farmasi nasional. Fitur peralatan instrumen

Pengukuran panjang gelombang ganda protein 280nm / 254nm

Molekul protein mengandung asam amino aromatik seperti tirosin dan tritin yang mengikat ganda. Mereka memiliki sifat penyerapan cahaya ultraviolet, puncak penyerapan pada panjang gelombang 280nm, dan nilai kepadatan optik penyerapan puncak dalam panjang gelombang ini proporsional dengan konsentrasinya, sehingga dapat digunakan sebagai dasar untuk kualitatif dan kuantitatif protein, karena itu, metode penyerapan ultraviolet di 280nm biasanya digunakan untuk pemantauan kontinyu konsentrasi protein dalam sistem pelapis. Tetapi karena kandungan tirosin dan tritin dari berbagai protein berbeda, untuk menentukan jumlah yang akurat, harus memiliki produk murni protein yang akan diukur sebagai standar untuk dibandingkan, atau telah mengetahui koefisien dimusnya sebagai referensi. Selain itu, banyak zat non-protein juga memiliki kapasitas penyerapan tertentu pada panjang gelombang 280nm, yang dapat mengganggu. Terutama efek asam nuklear (purin dan pirimidin) lebih parah. Penyerapan di 280nm 10 kali lebih kuat (per gram) daripada protein, tetapi

Asam nuklear diserap lebih kuat di 254nm, dengan puncak penyerapannya di sekitar 254nm. Faktor dimming pada asam nuklear 254nm adalah dua kali lipat dari 280nm, sedangkan protein sebaliknya, penyerapan UV 280nm lebih besar dari nilai penyerapan 254nm.

Biasanya

Rasio penyerapan cahaya protein murni: A280/A254 1,8

Rasio penyerapan cahaya asam nuklear murni: A280/A254 0,5

Oleh karena itu, ketika asam nukleus ada secara bersamaan dalam larutan protein (sebagian besar sistem biologis), OD254nm harus diukur secara bersamaan dengan OD280nm. Kemudian, berdasarkan rasio penyerapan kedua panjang gelombang, jumlah protein nyata diperhitungkan melalui rumus empiris untuk menghilangkan efek asam nukleus.

Konsentrasi protein = 1,45 × A280 – 0,74 × A254 (mg/ml)

Rumus eksperimental ini dibuat dengan data yang diukur dari serangkaian campuran protein (enanolase ragi) dan asam nuklea (asam nuklea ragi) yang diketahui memiliki konsentrasi yang berbeda.

Konfigurasi Sistem